DMEM/F-12（含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）

产品描述
DMEM/F-12培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)是DMEM培养基和Ham's F–12培养基的1:1混合物，是在DMEM培养基的基础上，添加F-12培养基中更为丰富的营养成分，含有多种微量元素。Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）是改良的Eagle基本培养基（BME），氨基酸和维生素浓度是BME的四倍。Ham's F–12以Ham's F-10培养基为基础，显著提高了胆碱、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度。DMEM/F-12被广泛用于支持多种哺乳动物细胞的生长，包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠的成纤维细胞等。同时，DMEM/F12常作为开发无血清培养基的基础，也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种高级细胞培养添加剂，可直接替代L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分，但其在水溶液中不稳定，易降解产生对细胞有害的氨；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分稳定，不会自发降解，其被细胞利用的机制为：细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略，可以提高L-谷氨酰胺的利用率，且不会产生多余的氨，更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无需适应，并且可以延长细胞的培养时间，减少传代次数，细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长，其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间，不影响后续培养。 
This DMEM/F-12 is modified as follows:

With	Without
• D-Glucose葡萄糖(3151mg/L)
• L-Alanyl-L-Glutamine L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(542mg/L)	• L-Glutamine谷氨酰胺
• Sodium Pyruvate丙酮酸钠(55mg/L)
• Phenol Red酚红(8.1mg/L)
• HEPES(3600mg/L)

详细配方请参考说明书
质控指标及依据
外观及澄清度（中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ B）
pH值（中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅵ H）
渗透压（中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ G）
细菌内毒素（中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ E）
微生物限度（中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ J）
细胞生长试验（中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条）
细胞生长试验
检测依据：中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条
方法：
1. 以5×10^4/ml细胞数将细胞接种到6孔板中，每种细胞每种培养基6个孔（48h检测用3个孔+48h换液用3个孔），起始培养基为含有5%FBS的待测培养基。
2. 培养箱中静置培养48h后，将每个板中3个检测孔的细胞消化收集，并使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
3. 将3个换液孔中的培养基吸弃，并加入无FBS的待测培养基。
4. 继续在培养箱中静置培养48h后，将换液孔中细胞消化，使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
稳定性实验
检测依据：行业标准及ICH指导原则
常规稳定性数据：推荐保质期为12个月，分别在2-8度储存条件下，检测3个月，6个月，12个月，16个月稳定性，结果无明显差异，符合质控标准
加速破坏实验：将产品存放于电子恒温箱内，分别测试在37摄氏度，45摄氏度，条件下的稳定性，每个温度下，分为三组，正置，倒置，水平放置，选取8小时，24小时，48小时，72小时节点进行测试，产品稳定性良好，无明显统计学差异
保存条件
2-8℃避光保存，有效期一年。常温运输。
注意事项
在进行细胞培养过程中，应注意无菌操作，避免被微生物污染。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作指南
操作方法：请致电销售人员
备注：所有报价均已含国内快递费及发票费用。库存情况可能有所变动，请与我们销售人员确认为准，价格情况请直接联系我们销售人员。