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DMEM高糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)

商品货号:JC1017
英文名字:DMEM high glucose(with Ala-Gln)
质量标准:细胞培养级
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产品介绍

产品描述
Dulbecco的改良Eagle培养基—DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一种广泛使用的基础培养基,适用于多种哺乳动物细胞培养,包括原代成纤维细胞,神经元,神经胶质细胞,HUVEC和平滑肌细胞,以及HeLa,293,Cos-7和PC-12等细胞系。DMEM是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。
DMEM培养基最初设计为葡萄糖含量1000mg/L的低糖型,后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L的高糖型,现已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖型普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分,但其在水溶液中不稳定,易降解产生对细胞有害的氨;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分稳定,不会自发降解,其被细胞利用的机制为:细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略,可以提高L-谷氨酰胺的利用率,且不会产生多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长,其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间,不影响后续培养。
This DMEM is modified as follows:

With含有  Without不含
• High glucose 葡萄糖 (4500mg/L) • HEPES
• Sodium Pyruvate丙酮酸钠 (110mg/L) • L-Glutamine L-谷氨酰胺
• Phenol Red 酚红 (15mg/L)  
•L-Alanyl-L-Glutamine L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 (4mM)  
详细配方请参考说明书
质控指标及依据
外观及澄清度(中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ B)
pH值(中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅵ H)
渗透压(中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ G)
细菌内毒素(中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ E)
微生物限度(中华人民共和国药典2010版二部附录Ⅸ J)
细胞生长试验(中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条)
细胞生长试验
检测依据:中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条
方法:
1. 以5×10^4/ml细胞数将细胞接种到6孔板中,每种细胞每种培养基6个孔(48h检测用3个孔+48h换液用3个孔),起始培养基为含有5%FBS的待测培养基。
2. 培养箱中静置培养48h后,将每个板中3个检测孔的细胞消化收集,并使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
3. 将3个换液孔中的培养基吸弃,并加入无FBS的待测培养基。
4. 继续在培养箱中静置培养48h后,将换液孔中细胞消化,使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
稳定性实验
检测依据:行业标准及ICH指导原则
常规稳定性数据:推荐保质期为12个月,分别在2-8度储存条件下,检测3个月,6个月,12个月,16个月稳定性,结果无明显差异,符合质控标准
加速破坏实验:将产品存放于电子恒温箱内,分别测试在37摄氏度,45摄氏度,条件下的稳定性,每个温度下,分为三组,正置,倒置,水平放置,选取8小时,24小时,48小时,72小时节点进行测试,产品稳定性良好,无明显统计学差异
保存条件
2-8℃避光保存,有效期一年。常温运输。
注意事项
在进行细胞培养过程中,应注意无菌操作,避免被微生物污染。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作指南
操作方法:请致电销售人员
备注:所有报价均已含国内快递费及发票费用。库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。

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